Cuando se grafica la
velocidad de la reacción, v0, contra la concentración de substrato, [S], no
siempre es posible determinar la condición en que se ha llegado a la velocidad
máxima, Vmax, debido al incremento de la
pendiente en la hipérbola a
concentraciones de substrato elevadas.
Figura: experimento cinético para la actividad enzimática.
Se presentan los valores experimentales y los
resultados del ajuste al modelo de Michaelis.
Aún así, si se grafica una doble recíproca, es
decir, el inverso de la velocidad (1/v0) contra el inverso de la
concentración de substrato (1/[S]), se obtiene una línea recta. El regráfico de
Lineweaver-Burke, también
se denomina de “dobles recíprocas” y se utiliza para calcular la Km y la Vmax
así como para determinar el mecanismo de acción de los diversos tipos de
inhibidores.
La ecuación que describe a la gráfca de Lineweaver-Burke es:
(3)
que describe una recta en donde el intercepto con
el eje de las abscisas es igual a –1/Km y el
intercepto con el eje de las ordenadas es igual a 1/Vmax.
Figura: experimento cinético para la actividad enzimática. Regráfico de Lineweaver-Burke
Se presentan los valores experimentales y los resultados del ajuste al
modelo.
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Última
actualización: 01 de Octubre de 2003
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