Los plásmidos

 

Los plásmidos son moléculas circulares de ADN que se replican de manera independiente al cromosoma de la célula hospedera. De manera natural se encuentran en las bacterias en tamaños que van desde 5,000 hasta 400,000 pb.

 

Pueden ser introducidos en las células bacterianas por un proceso denominado transformación. Las células y el plasmido se incubas juntos a 0°C en soluciones de cloruro de calcio, posteriormente se da un incremento de temperatura al medio de entre 37 y 43 °C, alternativamente se puede utilizar un choque de corriente eléctrica en una técnica denominada electroporación.

 

El fenómeno que permite que las células incorporen a los plásmidos por estos métodos, no es claro.

 

A la fecha se han obtenido muchos plásmidos a partir de los que ocurren de manera natural. Todos los vectores de clonación deben al menos contener:

 

1.- un origen de replicación para poder tener más de una copia del mismo en la célula infectada.

 

2.- dos genes que confieran resistencia a diferentes antibióticos, lo que permite la identificación de las células que portan a dicho vector.

 

 

 

 

 

                                    EcoRI                                 BamHI

 

      SalI

PstI

Resistencia                               Resistencia

a ampicilina                               a tetraciclina

     (ampR)                                  (tetR)

 

 

 

 


             Origen                          PvuII

          de replicación

  (Oric)

 

Figura: representación del plásmido pBR322 de Escherichia coli

En rojo se muestran las enzimas de restricción con que puede cortarse.

Las flechas indican los sitios de corte.

 

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BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR EN LÍNEA

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Comité asesor de publicaciones. Facultad de Medicina, UNAM

 

 

Dr. Edgar Vázquez-Contreras

Instituto de Química, UNAM

 

 

 

 

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Última actualización: 14 de Octubre de 2003

 

 

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